Bardzo dziękujemy za udział w trzeciej części naszego konkursu!
Bardzo dziękujemy za udział w trzeciej części naszego konkursu!
Prawidłowa odpowiedź to "B. czas przechowywania gotowego roztworu barwiącego"
Barwnik Coomassie brilliant blue G i R-250 są stosowane do ilościowego barwienia białek rozdzielonych w żelu poliakrylamidowym, w obecności SDS, z czułością rzędu 0,1-0,2 µg białka w prążku. Roztwór barwiący zawiera zazwyczaj 0,1% barwnika oraz wodny roztwór metanolu i kwasu octowego. Oprócz szerokiego zakresu liniowego, niskich kosztów i prostoty wykonania, do niewątpliwych zalet tej metody należy jej kompatybilność z możliwością dalszej analizy rozdzielonych i zabarwionych białek metodą spektometrii masowej.
Pomimo powszechnego stosowania tej metody, często zdarza się jeszcze, iż gotowy roztwór barwiący jest używany wielokrotnie i/lub przechowany przez okres kilku tygodni. W czasie jego tak długiego przechowywania w temperaturze pokojowej zachodzi reakcja przekształcenia metanolu w formaldehyd. Ponadto w czasie barwienia, najszybciej odparowuje z tego roztworu także alkohol. W rezultacie prowadzi to spadku czułości oraz wzrostu tła żelu.
Aby uniknąć tego problemu,
proponujemy gotowy, ekonomiczny i stabilny w temperaturze pokojowej Roztwór
Barwnika Commassie (nr kat. 200-107 ) Procedura przygotowania gotowego roztworu
brawiacego Coomassie polega na pobraniu kilku ml gotowego Barwnika Commassie
do kuwety barwiącej i uzupełnienie go woda i kwasem octowym do objętości ok.
100 ml.Taki gotowy roztwór barwiący może być użyty kilkukrotnie w czasie tego
samego dnia lub max 2-3 dni. W przygotowanym bezpośrednio przed użyciem roztworze
barwiącym, czas barwienia białek w żelu PA można skrócić do 15-20 minut.
PORADA LABORATORYJNA
W celu zapewnieni czystego tła żelu w czasie odbarwiania oraz zredukowania liczby wymian odbarwiacza proponujemy włożenie do kuwety z żelem w czasie odbarwiania kawałka gąbki. Korzystnie bezbarwnej (jasnej). W czasie odbarwiania barwnik Coomassie który wypłucze się z żelu (cząsteczki nie związane z białkami) zwiąże się nieodwracalnie z gąbką co sprawia, że wymiana roztworu Odbarwiacza nie będzie konieczna.
Zwycięzcami trzeciej części naszego KONKURSU są:
1. Pani Ewa z Białegostoku
2. Pan Krzysztof z Bonina k. Koszalina
Zwycięzcy otrzymują termobloki!
GRATULUJEMY!